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細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)

簡要描述：細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。

更新時(shí)間：2024-10-26 00:00:00
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細(xì)胞周期測定可以：（1）作為生物相容性評價(jià)指標(biāo)；（2）用于研究細(xì)胞凋亡；（3）作為選擇細(xì)胞的依據(jù)。

流式細(xì)胞儀的工作原理是將待測細(xì)胞放入樣品管中，在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動(dòng)室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出，形成細(xì)胞柱。通過對流動(dòng)液體中排列成單列的細(xì)胞進(jìn)行逐個(gè)檢測，得到該細(xì)胞的光散射和熒光指標(biāo)，分析出其體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等物理及化學(xué)特征。

細(xì)胞內(nèi)的DNA含量隨細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生周期性變化，如G0/G1期的DNA含量為2C，而G2期的DNA含量是4C。碘化丙啶( Propidium，簡稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。假定G0和G1期的細(xì)胞熒光強(qiáng)度為1，那么G2和M期的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為2，S期的細(xì)胞介于1和2之間。細(xì)胞凋亡時(shí)，由于細(xì)胞核皺縮和DNA片段化，染色時(shí)DNA片段會從打孔的細(xì)胞膜處丟失，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，熒光強(qiáng)度小于1，即Sub-G1峰或者凋亡細(xì)胞峰。

細(xì)胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式細(xì)胞儀對細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測定，然后根據(jù)DNA含量的分布情況，可分析細(xì)胞周期各時(shí)相的百分比。

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