視網(wǎng)膜是眼睛中感受光線的神經(jīng)區(qū)域,它起源于神經(jīng)外胚層。眼睛是一個結(jié)構(gòu)復(fù)雜的器官,由多種細(xì)胞以三維方式組成,而視網(wǎng)膜作為眼睛的一部分,其結(jié)構(gòu)也相當(dāng)復(fù)雜。視網(wǎng)膜發(fā)育初期形成兩個相鄰的上皮細(xì)胞層,分別是外側(cè)的視網(wǎng)膜色素上皮層和內(nèi)側(cè)的神經(jīng)視網(wǎng)膜層,最終形成包含光受體層和支持細(xì)胞層的組織。
視杯類器官可由人類胚胎干細(xì)胞(ESC)或小鼠ESCs來源制備。在視網(wǎng)膜分化過程中,將人胚胎干細(xì)胞(hESC)在含Y 27632的視網(wǎng)膜分化培養(yǎng)基中重新聚集,然后在培養(yǎng)的第2天至第18天期間添加Matrigel。為了形成視杯細(xì)胞,需要在培養(yǎng)的第15天至第18天期間向分化培養(yǎng)基中添加CHIR 99021(或重組Wnt3A)和重組人Sonic Hedgehog(Shh)。
這些人類視網(wǎng)膜類器官與小鼠的視網(wǎng)膜有許多相似的特征,但同時也具有人類視網(wǎng)膜的一些特點。其中一個顯著特點是,人類視網(wǎng)膜類器官較大,發(fā)育需要更長的時間,并且可以形成含有視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞的多層組織,在小鼠ESC的培養(yǎng)中視錐細(xì)胞的分化非常罕見。
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