類器官制備的典型方法首先需要分離胚胎或多能干細胞，然后將它們培養(yǎng)在支持介質（如Matrigel等基質膠）上，以促使其三維生長。類器官中含有多種已分化的細胞類型，這些細胞類型在體內(nèi)相應的器官中也存在。例如，Sato等人報道的小腸類器官模型中可以觀察到小腸上皮的所有細胞類型^[3]。制導類器官形成的信號通路與體內(nèi)器官發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的信號通路相同，因此，在培養(yǎng)基中需要添加細胞因子、生長因子和小分子，以激活或抑制參與類器官形成的特定信號通路。不同類型的類器官制備需要使用不同的添加物組合，即使是對于結構非常相似的組織，如小腸和結腸，其添加物組合也會有所不同^[4]。

在類器官的培養(yǎng)中，存在多種不同的方法，其中一些方法目前仍在初探階段。下文將提供一些類器官培養(yǎng)的實例，并重點介紹細胞因子、生長因子和小分子在這些方法中的應用。

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